Полученные в организме CAR-T-лимфоциты помогли при аутоиммунных неврологических заболеваниях

Китайские исследователи представили результаты пилотных клинических испытаний произведенных in vivo Т-лимфоцитов с химерными антигенными рецепторами при аутоиммунных неврологических заболеваниях. У всех 16 участников наблюдалось клиническое и биологическое улучшение, переносилась терапия хорошо. Сообщение об испытаниях опубликовано в The New England Journal of Medicine.

Т-лимфоциты с химерными антигенными рецепторами (CAR-T-лимфоциты, подробно о них рассказано в материале «Химера против рака»), нацеленные на поверхностный антиген В-лимфоцитов CD19, изначально разработаны для лечения В-клеточных онкозаболеваний. В ходе последующих клинических испытаний они оказались перспективны для терапии аутоиммунных заболеваний, в том числе неврологических. Обычно CAR-T-лимфоциты получают ex vivo: выделяют из крови пациента Т-клетки, в лаборатории с помощью вирусного вектора трансдуцируют их генетическим конструктом химерного рецептора, размножают и вводят обратно в организм. Это длительный и дорогостоящий процесс, и предпринимаются попытки получения CAR-T-лимфоцитов непосредственно в организме — они уже увенчались успехом в пилотных доклинических и клинических экспериментах.

Юйхан Чэн (Yu-Hang Cheng), его коллеги по Хуачжунскому научно-технологическому университету и компания Shenzhen Genocury Biotech провели пилотные открытые нерандомизированные испытания экспериментального препарата JY231. Он представляет собой генетический конструкт анти-CD19-CAR на лентивирусном векторе для получения CAR-T-лимфоцитов in vivo. В работе приняли участие 16 взрослых пациентов с рефрактерными аутоиммунными неврологическими заболеваниями: семь с прогрессирующим рассеянным склерозом и по три с болезнью, связанной с антителами к миелин-олигодендроцитарному гликопротеину (MOGAD), генерализованной миастенией и идиопатическими воспалительными миопатиями. Всем им однократно ввели JY231 в дозе два миллиарда трансдуцирующих единиц в виде внутривенной инфузии без предварительной лимфодеплеции.

У всех участников введение JY231 привело к размножению CAR-T-лимфоцитов медианное пиковое число копий вектора составило 53962,5 на микрограмм ДНК к 11 дню. Число копий вектора в цереброспинальной жидкости было больше, чем в крови и костном мозге, белок вирусного капсида p24 перестал определяться в периферической крови на четвертый день. Секвенирование РНК одиночных клеток и проточная цитометрия подтвердили высокоточное таргетирование: более 99 процентов CAR+ клеток были Т-лимфоцитами. Признаков инсерционного мутагенеза и онкогенной клональной экспансии не было. Размножение CAR-T-лимфоцитов сопровождалось быстрой и полной деплецией В-лимфоцитов с транзиторным дефицитом иммуноглобулинов. Последующая репопуляция более чем через два месяца после инфузии происходила преимущественно за счет наивных В-клеток с полной заменой исходных клонотипов В-клеточного рецептора.

Легкий синдром выброса цитокинов развился у 11 участников на 4–28 день после инфузии, у всех он прошел в течение двух недель. Синдрома нейротоксичности ICANS и синдрома локальной токсичности LICATS зафиксировано не было. В первые сутки после инфузии наблюдалась острая лимфопения с повышением уровня нейтрофилов, эти гематологические флуктуации разрешились спонтанно. Через медианный период наблюдения в шесть месяцев у пациентов со всеми заболеваниями наблюдалось клиническое и биологическое улучшение.

При рассеянном склерозе наблюдалось повышение дееспособности по шкале EDSS, улучшение моторных и когнитивных функций и уменьшение утомляемости. Это сопровождалось снижением уровня биомаркеров нейроаксонального повреждения, интратекального синтеза иммуноглобулина G и активации микроглии по ПЭТ/МРТ. Новых очагов демиелинизации на МРТ на третий и шестой месяцы не было. При MOGAD наблюдалось снижение титра аутоантител к MOG. При генерализованной миастении снизилась активность заболевания по шкалам QMG и MG-ADL, что коррелировало со снижением уровня антител к ацетилхолиновым рецепторам. При идиопатических воспалительных миастениях повысилась мышечная сила, уменьшился сывороточный уровень креатинкиназы, уменьшились уровни аутоантител и признаки воспаления мышц по данным визуализации.

Результаты пилотных испытаний послужили доказательством концепции того, что продукция CAR-T-лимфоцитов in vivo позволяет обойтись без сложного процесса их изготовления в лаборатории и токсичной лимфодеплеции, вызывает преодолимые побочные эффекты и может быть эффективной для терапии рефрактерных аутоиммунных неврологических заболеваний.

Помимо неврологических расстройств CAR-T-терапию в экспериментальных условиях успешно применяли при системной красной волчанке и склеродермии, ревматоидном артрите, аутоиммунной анемии, реакции «трансплантат против хозяина» и одновременно трех аутоиммунных заболеваниях у одной пациентки, а также для трансплантации почек пациентам с антителами ко всем потенциальным донорам.