Пациент долгое время работал с гнилой древесиной
В Индии миколог, который занимался исследованием растительных патогенов в мертвых деревьях, впервые в истории заразился паразитирующим на деревьях грибком Chondrostereum purpureum — хондростереумом пурпурным. У пациента не было нарушений иммунитета, в том числе ВИЧ-инфекции и диабета, и он не принимал иммуносупрессоры. Отчет о случае опубликован в журнале Medical Mycology Case Reports.
Обычно Chondrostereum purpureum паразитирует на живых деревьях, вызывая «млечный блеск» — заболевание, при котором грибок покрывает ветки и листья деревьев, после чего они приобретают серебряный, млечный оттенок. На стволе (и живом, и мертвом) гриб растет многочисленными черепитчатыми группами. При дальнейшем развитии болезни древесина разрушается и сгнивает, и грибок продолжает в ней жить.
У людей с ослабленным иммунитетом паразиты растений (в том числе грибковые) считаются условно-патогенными возбудителями инфекций. Однако Сома Датта (Soma Dutta) из Больницы Аполлона описала случай заражения 61-летнего индийского миколога, который занимался паразитарными грибками растений, Chondrostereum purpureum.
Пациент обратился в больницу с жалобами на охрипший голос, кашель и затруднения при глотании. Кроме того, его беспокоила постоянная усталость и потеря веса в течение трех месяцев. Пациент не страдал от диабета, ВИЧ-инфекции и хронических заболеваний внутренних органов. Он не принимал иммуносупрессивные препараты и не получал травм в последнее время.
Рентгенография грудной клетки не показала никаких отклонений. Компьютерная томография (КТ) шеи выявила паратрахеальный абсцесс справа, который под контролем КТ вскрыли и аспирировали содержимое. Гистологическое исследование аспирата показало нейтрофилы и клетки слизистой оболочки бронхов и трахеи на фоне геморрагического некроза.
Бактериологическое исследование аспирата не выявило патогенных возбудителей (в том числе микобактерий), а окрашивание на грибы показало перегородчатые гифы. После посева гнойного аспирата через 4-5 дней инкубации выросла кремово-пастообразная колония с желтовато-коричневым оттенком на основании. При окрашивании врачи обнаружили круглые и трубчатые грибковые элементы.
Поскольку врачи не смогли по морфологии идентифицировать грибок, они отправили образцы в сертифицированную лабораторию Всемирной организации здравоохранения для секвенирования ДНК. Анализ показал, что в аспирате присутствует ДНК Chondrostereum purpureum. Пациент отрицал, что взаимодействовал с этим грибковым патогеном растений в своей работе, однако подтвердил, что долгое время работал с разлагающейся древесиной.
Гной полностью дренировали из полости абсцесса, а пациенту назначили схему лечения вориконазолом. Спустя два года после выздоровления пациент был абсолютно здоров, рецидива инфекции не произошло.
Хотя грибковые заболевания встречаются у людей гораздо реже бактериальных и вирусных, они могут доставить много хлопот с их лечением. В США, например, продолжает распространяться грибок, который устойчив к большинству известных противогрибковых препаратов. А некоторые люди и вовсе ищут порой весьма спорные способы лечения: так, китаец решил вылечить грибковую кожную инфекцию внутривенным введением ртути. Врачи успели его спасти.
Клинические испытания продолжаются
Британские и новозеландские исследователи сообщили о первом успехе редактирования оснований ДНК в лечении наследственной гиперхолестеринемии. После однократного введения терапевтической дозы препарата снижение уровня «плохого» холестерина у пациентов составило до 55 процентов. При этом у двух из них за период наблюдения произошел инфаркт миокарда, в одном случае — фатальный. Промежуточные результаты первой фазы клинических испытаний авторы представили на научных сессиях Американской кардиологической ассоциации AHA 2023 в Филадельфии. Гетерозиготная семейная гиперхолестеринемия (ГеСГХС) — аутосомно-доминантное заболевание, при котором из-за мутации одного гена в крови повышается уровень холестерина липопротеидов низкой плотности (ЛПНП-ХС, в обиходе его часто называют «плохим» холестерином). Это заболевание наблюдается примерно у одного человека из 220 и часто остается невыявленным, поскольку длительно протекает бессимптомно. При этом ГеСГХС способствует развитию ускоренной атеросклеротической болезни сердца и сосудов, а следовательно, ишемической болезни сердца, инфаркта миокарда и инсульта. Без лечения, начатого в раннем возрасте, риск коронарного события (нестабильной стенокардии, инфаркта, сердечной смерти) достигает 50 процентов к 50 годам у мужчин и 30 процентов к 60 годам у женщин. В 85–90 процентах случаев ГеСГХС связана с мутацией гена рецептора ЛПНП (LDL-R), в 5–15 процентах — компонента ЛПНП аполипопротеина B (apoB) и в 1–5 процентах — пропротеиновой конвертазы субтилизин-кексинового типа 9 (PCSK9), которая удаляет LDL-R из клеток. В поисках эффективного метода лечения ГеСГХС американская биотехнологическая компания Verve Therapeutics воспользовалась технологией редактирования оснований, разработанной на основе системы CRISPR-Cas в лаборатории Дэвида Лю (David Liu) в Гарвардском университете. Экспериментальный препарат VERVE-101 содержит направляющую РНК, которая распознает искомую последовательность в гене PCSK9, и матричную РНК, которая кодирует белок АВЕ, заменяющий в заданном месте одной цепочки аденин на гуанин, что в итоге полностью выключает ген. Эти РНК упакованы в липосомную оболочку, которая прицельно доставляет их в клетки печени, где экспрессируется PCSK9. В ходе длящихся клинических испытаний Ib фазы heart-1 (VT-1001) внутривенные инфузии VERVE-101 однократно проводят пациентам в возрасте от 18 до 75 лет с ГеСГХС, развившейся атеросклеротической болезнью сердца и сосудов, а также повышенным уровнем ЛПНП-ХС, который не удается контролировать максимальными дозами стандартных липидснижающих препаратов. В предварительном сообщении Эндрю Беллингера (Andrew Bellinger) из Verve Therapeutics с соавторами содержатся данные о первых 10 пациентах, получивших экспериментальный редактор оснований в Великобритании и Новой Зеландии (восемь из них — мужчины, средний возраст 54 года, средний уровень ЛПНП-ХС 5,0 миллимоль на литр). Шесть из них получили субтерапевтические дозы 0,1 и 0,3 миллиграмм на килограмм массы тела, остальные четыре — потенциально терапевтические 0,45 и 0,6 миллиграмм на килограмм массы тела. Для уменьшения возможных реакций на препарат всем им проводили премедикацию дексаметазоном и антигистаминными препаратами. У двух пациентов после введения 0,45 миллиграмм на килограмм массы тела усредненное по времени снижение уровня PCSK9 в крови составило 59 и 84 процента, ЛПНП-ХС — 39 и 48 процента. У пациента, получившего максимальную дозу, эти показатели составили 47 и 55 процентов соответственно, причем снижение ЛПНП-ХС оставалось стабильным на протяжении 180 дней наблюдения (в доклинических испытаниях на обезьянах оно продолжалось не менее двух с половиной лет). За истекшее время серьезные кардиологические нежелательные события возникли у двух пациентов. Один их них, получивший дозу 0,3 миллиграмм на килограмм массы тела, страдал ишемической кардиомиопатией и ранее переносил остановку сердца. Он умер от очередной остановки сердца спустя пять недель после введения препарата, вскрытие выявило тяжелое атеросклеротическое поражение коронарных артерий без признаков тромба в них, воспаления миокарда или эмболии легочных артерий. Исследователи и независимые эксперты пришли к выводу, что это осложнение не связано с экспериментальной терапией. Второй пациент, получивший дозу 0,45 миллиграмм на килограмм массы тела, до лечения испытывал нестабильные боли в области сердца, о чем не сообщил персоналу. Через день после инфузии VERVE-101 он перенес нефатальный инфаркт миокарда и непродолжительный пароксизм желудочковой тахикардии, коронарография выявила у него рестеноз стентов в левых коронарных артериях. Исследователи и эксперты не смогли исключить связь инфаркта с лечением из-за близости по времени, желудочковую тахикардию сочли не связанным событием. Кроме того, у пациента, получившего максимальную дозу, зарегистрировали временное повышение уровня печеночных трансаминаз после введения препарата. К прекращению испытаний зарегистрированные осложнения не привели, однако стоимость акций Verve Therapeutics упала почти на 40 процентов. Набор пациентов в испытания heart-1 продолжается, их продолжительность запланирована на год с последующим длительным наблюдением за пациентами в течение 14 лет. Попутно компания разрабатывает препарат VERVE-102, который также инактивирует ген PCSK9, но РНК в нем упакованы в проприетарную липосомную оболочку GalNAc-LNP, которая обеспечивает доставку в клетки печени, лишенные LDL-R из-за гомозиготной семейной гиперхолестеринемии. Начало его испытаний запланировано на первую половину 2024 года. Впервые экспериментальную CRISPR-терапию применили у людей в 2020 году, она была направлена на лечение одной из форм врожденной слепоты — амавроза Лебера 10 типа. Спустя год появилось сообщение о ее частичном успехе. Тогда же CRISPR-препарат впервые ввели людям внутривенно — для борьбы с транстиреиновым амилоидозом. Также технологию CRISPR применяли для изготовления противораковых CAR-T-лимфоцитов и редактирования генов стволовых клеток крови при серповидноклеточной анемии, которые затем вводили пациентам. В настоящее время ведутся доклинические испытания CRISPR-терапии многих других заболеваний, включая ВИЧ-инфекцию, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз и буллезный эпидермолиз.