CAR-T-клетки с отредактированными основаниями помогли при остром Т-лимфобластном лейкозе

Британские исследователи сообщили об успехе первой фазы клинических испытаний терапии Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза Т-лимфоцитами с химерными антигенными рецепторами и отредактированными азотистыми основаниями. У девяти из 11 пациентов достигнута стойкая ремиссия заболевания, позволившая выполнить им трансплантацию костного мозга, семь оставались в ремиссии по окончании испытаний. Отчет об испытаниях опубликован в The New England Journal of Medicine.

Применение Т-лейкоцитов с химерным антигенным рецептором (CAR-T-лимфоцитов) позволяет достигать успехов в лечении онкозаболеваний, устойчивых к другим видам терапии (подробно об этой технологии рассказано в материале «Химера против рака»). Наибольших успехов пока удалось достичь в лечении новообразований, вызванных В-лимфоцитами, поскольку у них есть специфические антигены, которые служат хорошей мишенью для CAR-T-терапии. Такие препараты (и единственный для терапии одного вида сарком) уже есть на рынке, в экспериментах их успешно применяли и для лечения аутоиммунных заболеваний. Против других злокачественных новообразований создать CAR-T-клетки сложнее, и препараты на основе них пока не вышли из стадии доклинических и клинических испытаний. Т-клеточные образования представляют особую проблему, поскольку у терапевтических клеток и их мишеней почти идентичный антигенный состав (и те, и другие — Т-лимфоциты), и нужно сделать так, чтобы CAR-T-клетки не атаковали друг друга.

Для решения этой задачи специалисты из Лондонского университетского колледжа использовали Т-лимфоциты здоровых доноров, которые с помощью лентивирусного вектора трансдуцировали геном CAR, специфичным к Т-клеточному антигену CD7. Также они воспользовались редактированием азотистых оснований (эта технология, разработанная на основе CRISPR-Cas, позволяет изменять отдельные «буквы» генетического кода без разрывов двойной цепи ДНК, подробнее о ней рассказано здесь). С его помощью в трансгенных клетках выключили гены, кодирующие CD52 (чтобы сделать клетки нечувствительными к лимфодеплеции), CD7 (чтобы они не атаковали друг друга) и β-цепи αβ-Т-клеточного рецептора (для профилактики реакции «трансплантат против хозяина»). Эти клетки (BE-CAR7) успешно испытали в пилотном эксперименте с участием трех пациентов.

Васим Касим (Waseem Qasim) из Лондонского университетского колледжа с коллегами провел открытые нерандомизированные испытания первой фазы в двух клинических центрах. В них приняли участие девять детей в возрасте от 5 до 15 лет (основной контингент испытаний) и две женщины 27 и 38 лет (по лицензии на использование препарата по гуманным соображениям) с рефрактерным или рецидивирующим острым Т-лимфобластным лейкозом. Всем им провели лимфодеплецию флударабином, циклофосфамидом и анти-CD52 антителами (алемтузумабом) и ввели заранее изготовленные BE-CAR7 в дозе от 0,2 × 10⁶ до 2 × 10⁶ клеток на килограмм массы тела. 56 процентов этих клеток экспрессировали CAR к CD7 (в среднем 3,6 копий вектора на клетку), 99 процентов были CD7-негативными, 98 процентов — CD52-негативными, остаточная экспрессия αβ-ТКР составляла 0,1 процента. Основной целью испытаний первой фазы было проверить безопасность терапии, вторичной — оценить уровень достижения ремиссии и выживаемость.

Лимфодеплеция и инфузия BE-CAR7 не произвели неприемлемых побочных эффектов, циркулирующие трансгенные клетки выявлялись у всех пациентов. Осложнения включали синдром выброса цитокинов 1–4 степени, нейротоксический синдром ICANS, преходящую сыпь, мультилинейную цитопению и оппортунистические инфекции. На 28 день у всех участников наблюдалась полная морфологическая ремиссия с неполным восстановлением количества клеток. По данным проточной цитометрии и полимеразной цепной реакции у девяти пациентов достигнута глубокая ремиссия, позволившая выполнить трансплантацию донорских кроветворных стволовых клеток, еще у двух в костном мозге выявлялось минимальное остаточное заболевание, и им назначили паллиативную помощь.

Трансплантация устранила остававшиеся BE-CAR7 и привела к мультилинейному восстановлению кроветворения. У трех участников наблюдались значимые осложнения, связанные с реактивацией вирусных инфекций. На момент окончания наблюдения через 3–36 месяцев после трансплантации восемь пациентов оставались живы: семь в ремиссии и один с лейкозом, вызванным CD7-негативными клетками.

Первая фаза испытаний показала, что универсальные донорские анти-CD7 CAR-T-клетки с отредактированными азотистыми основаниями удовлетворительно переносятся и приводят к длительной ремиссии острого Т-лимфобластного лейкоза у большинства пациентов. Эта работа стала первым случаем, когда клетки с отредактированными азотистыми основаниями использовали у людей. Испытания препарата продолжаются.

В июле 2025 года китайские и бельгийские исследователи сообщили о результатах пилотных клинических испытаний технологии получения CAR-T-клеток непосредственно в организме человека. В них приняли участие четыре пациента с множественной миеломой, у двух был получен полный ответ на терапию, еще у двух — частичный.